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在細(xì)胞培育中怎么消除組織培育的污染呢？
發(fā)布時(shí)間： 2019-09-19 點(diǎn)擊次數(shù)： 1740次當(dāng)重要的培育污染時(shí)，研究者可能企圖消除或控制污染。首要，確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母，把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔脫離，用試驗(yàn)室消毒劑消毒培育器皿和超凈臺(tái)，檢查HEPA過(guò)濾器。 高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對(duì)一些細(xì)胞系，因而，做劑量反應(yīng)試驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素發(fā)生的劑量水平。下面是我司推薦的確定水平和消除培育污染的試驗(yàn)過(guò)程：
?1. 在無(wú)抗生素的培育基中消化、計(jì)數(shù)和稀釋細(xì)胞，稀釋到慣例細(xì)胞傳代的濃度。
2. 渙散細(xì)胞懸液到多孔培育板中，或幾個(gè)小培育瓶中。在一個(gè)濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個(gè)孔中。
3. 每天觀測(cè)細(xì)胞目標(biāo)，如脫落，出現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。
4. 確定抗生素水平后，使用低于濃度2～3倍濃度的抗生素的培育液培育細(xì)胞2～3代。
5. 在無(wú)抗生素的培育基中培育細(xì)胞一代。
6. 重復(fù)過(guò)程4。
7. 在無(wú)抗生素的培育基中培育4～6代，確定污染是否以已被消除。